16S/18S/ITS微生物測序技術(shù)服務(wù)

產(chǎn)品介紹
微生物群落多樣性分析是指利用二代高通量測序技術(shù)，對微生物的16S rDNA、18S rDNA以及ITS高變區(qū)域，或者功能基因進(jìn)行測序，分析環(huán)境中細(xì)菌、古細(xì)菌以及真菌的種類組成和含量，揭示環(huán)境樣品中微生物種類以及它們之間的相對豐度和進(jìn)化關(guān)系，進(jìn)一步探討微生物多樣性；對于研究微生物與人類醫(yī)療健康、食品安全、環(huán)境檢測與治理、微生物資源的利用等有著重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。
 
產(chǎn)品分類
16S rDNA測序：16S rDNA為編碼原核生物核糖體小亞基rRNA的DNA序列，存在于所有細(xì)菌染色體基因中，共包括9個(gè)可變區(qū)和10個(gè)保守區(qū)，保守序列區(qū)域反映了生物物種間的親緣關(guān)系，而高變序列區(qū)域則能體現(xiàn)物種間的差異。采用HiSeq或的MiSeq測序儀，對16S rDNA某個(gè)高變區(qū)進(jìn)行測序，進(jìn)一步分析環(huán)境微生物中細(xì)菌或古細(xì)菌的多樣性。
18S rDNA測序：18S rDNA為編碼真核生物核糖體小亞基rRNA的DNA序列。在結(jié)構(gòu)上分為保守區(qū)和高變區(qū)，保守區(qū)反映生物物種間的親緣關(guān)系，高變區(qū)反映物種間的差異。
ITS測序：ITS分為兩個(gè)區(qū)域：ITS1/ITS2，其中ITS1位于真核生物核糖體rDNA序列18S和5.8S之間，ITS2位于真核生物核糖體rDNA序列5.8S和28S之間。ITS序列由于自然選擇壓力小，因此在進(jìn)化過程中能夠承受更多的變異，通過對ITS1或者ITS2進(jìn)行測序，可分析環(huán)境微生物中真菌的多樣性。
技術(shù)流程
 
技術(shù)參數(shù)
測序平臺：HiSeq2500；MiSeq
測序策略：PE250
測序周期：25-40工作日
測序數(shù)據(jù)：不低于合同規(guī)定數(shù)據(jù)量
標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)分析
● 原始測序數(shù)據(jù)預(yù)處理   
● 稀釋曲線（Rarefaction Cur ve）   
● OTU劃分&OTU注釋&物種分類注釋   
● 物種系統(tǒng)發(fā)育樹
● 多樣性指數(shù)分析  
● 物種組成統(tǒng)計(jì)熱圖   
● 群落結(jié)構(gòu)：OTU分類   
● 物種豐富程度&均勻程度（Rank Abundance曲線）
● 主成分分析（Principal component analysis， PCA）
深度數(shù)據(jù)分析
● 多樣品OTU分布網(wǎng)狀圖（Network）   
● 單因素方差分析   
● 多樣品O TU分布比較（Venn圖）
● 多樣品（微生物群落）分層聚類UPGMA    
● 樣本聚類UP GMA可靠性Support分析
● 主坐標(biāo)分析PCoA（2D/3D）圖   
● 基于Unifrac 距離的箱型圖（Box-Plot）分析
● 含分類單元主坐標(biāo)分析PCoA圖（3D Bi-Plot）  
● 差異對比NMD S分析
● 冗余分析RDA（線性模型）/典型對應(yīng)分析CCA（單峰模型）   
● 含多樣品分類餅圖
● LEfSe分析（組間比較分析）   
● Adonis組間比較分析（基于Unifrac距離矩陣）
引物信息
 
樣本要求
糞便：采集新鮮糞便樣品于無菌容器中，每份樣品5g左右即可，液氮速凍3-5min，-80°C長期保存，干冰運(yùn)輸。
土壤：采集土壤樣本5g左右無菌容器中，液氮速凍3-5min，然后轉(zhuǎn)移-80°C 或液氮中長期保存，干冰運(yùn)輸。
污泥：采集污泥樣本于無菌容器中，每份樣品5g左右即可，液氮速凍3-5min， -80°C長期保存，干冰運(yùn)輸。
水體：1、對于水質(zhì)較為清澈的水樣，用0.22μm 的微孔濾膜真空過濾水樣（1 L左右），富集于無菌管中，液氮速凍3-5min，干冰運(yùn)輸。2、對于水質(zhì)較為混濁的水樣，三點(diǎn)水樣混合搖勻后取60-80mL，液氮速凍3-5 min，-80℃保存，干冰運(yùn)輸。
皮膚：采用無菌棉簽輕輕刮取皮膚表面，取樣后將棉簽置于無菌的離心管，液氮速凍3-5min，-80℃長期保存，干冰運(yùn)輸。
服務(wù)流程
1、提交項(xiàng)目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)討論項(xiàng)目細(xì)節(jié)。
3、根據(jù)討論后的意見對實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行修改。
4、雙方均滿意并達(dá)成一致，簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開展實(shí)驗(yàn)，按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。
6、結(jié)題，提供實(shí)驗(yàn)原始結(jié)果和分析結(jié)果、實(shí)驗(yàn)流程、實(shí)驗(yàn)條件等等。
我們的優(yōu)勢
1、適用于單細(xì)胞、微量細(xì)胞樣品。
2、數(shù)據(jù)質(zhì)量高、偏差小、高度均一。
3、高通量，單個(gè)樣本可達(dá)30-100X的測序深度和數(shù)據(jù)產(chǎn)出量。
4、*的覆蓋度，能檢測到90%以上的SNP位點(diǎn)信息。
5、檢測靈敏度和準(zhǔn)確度高。
6、能夠全面發(fā)掘新的和稀有的遺傳變異
咨詢與訂購 
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