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      TECHNICAL ARTICLES

      技術(shù)文章

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      病毒載體構(gòu)建/慢病毒包裝

      更新時間:2019-03-05點擊次數(shù):3071

      技術(shù)簡介
      慢病毒(Lentivirus)載體是以HIV-1(人類免疫缺陷Ⅰ型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來的基因治療載體,屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科,慢病毒屬,基因結(jié)構(gòu)復(fù)雜,共包含9個基因,其中有3個和單純逆轉(zhuǎn)錄病毒相似結(jié)構(gòu)的基因:gag、pol、env;4個輔助基因:vif、vpr、nef、vpu和2個調(diào)節(jié)基因:tat和rev。該病毒能夠?qū)谢驅(qū)氲揭恍┹^難轉(zhuǎn)染的細胞,如原代細胞等,并且將靶基因隨機整合到宿主的基因組中,可作為一種體外運輸工具,從而大大增加了轉(zhuǎn)染率,同時具有感染分裂期和非分裂期細胞、容納外源性基因片段,可以穩(wěn)定表達,持續(xù)時間長等顯著優(yōu)點。非常適用于基因過表達穩(wěn)定細胞株的建立和RNA研究。
      慢病毒包裝系統(tǒng)一般由慢病毒表達和慢病毒包裝載體組成,慢病毒表達載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。構(gòu)建原理是將HIV2基因組中的順式作用元件(包裝信號和、長末端重復(fù)序列)和編碼反式作用蛋白的序列進行分離。
       

      慢病毒包裝實驗流程

      技術(shù)應(yīng)用

      應(yīng)用于穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的篩選
      為活體動物模型試驗提供高質(zhì)量的包含目的基因的病毒液
      對于一些難轉(zhuǎn)染的細胞,大大提高目的基因的轉(zhuǎn)導(dǎo)效率

      客戶提供
      客戶與我司溝通商討的試驗方案
      靶基因信息,模板或測序報告,
      是否自行構(gòu)建病毒載體,若需要本貴公司提供載體,需要額外收取費用

      質(zhì)量控制
      測序鑒定
      根據(jù)特定引物作RT-PCR鑒定
      蛋白表達鑒定(根據(jù)客戶需求,客戶提供單克隆抗體)

      實驗周期
      20~30個工作日

      我們的優(yōu)勢
      1、提供各種實驗材料和儀器,滿足項目課題實驗需要。
      2、專業(yè)的操作人員。
      3、高規(guī)格實驗室。
      4、數(shù)據(jù)結(jié)果交付周期快。
      5、完善的服務(wù)體系,全程跟進,確保滿意。

      服務(wù)流程
      1、提交項目課題相關(guān)需求和資料。
      2、與我們的專業(yè)技術(shù)團隊討論項目細節(jié)。
      3、根據(jù)討論后的意見對實驗方案進行修改。 
      4、雙方均滿意并達成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
      5、開展實驗,按期完成合同規(guī)定的內(nèi)容。
      6、結(jié)題,提供實驗原始結(jié)果和分析結(jié)果、實驗流程、實驗條件等等。

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