原代培養和傳代培養主要區別是什么？

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一、原代培養

原代培養即第一次培養，是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養，中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義：

1.養物一經接種到培養器皿（瓶）中就不再分割，任其生長繁殖；

2.原代培養中的“代"并非細胞的“代"數，因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞；

3.原代培養過程中不分割培養物不等于不更換培養液，也不等于不更換培養器皿。

正常細胞培養的世代數有限，只有癌細胞和發生轉化的細胞才能無限生長下去。所謂轉化即是指正常細胞在某種因子的作用下發生突變而具有癌性的細胞。世界上許多實驗室所廣泛傳用的HeLa細胞系就是1951年從一位名叫Henrietta Lacks的婦女身上取下的宮頸癌細胞培養而成。此細胞系一直延用至今。原代培養是建立各種細胞系（株）必經的階段，其是否成功與組織污染與否、供體年齡、培養技術和方法、適宜培養基的選擇等多種因素有關。由于原代培養的細胞轉化性極小，對病毒敏感性好，因此適應制備疫苗等生物制品；但也存在有潛在外源因子、不能事先檢查標本、且受供體年齡健康狀況的影響而導致批間差異大等缺陷。常用的原代細胞培養有雞胚成纖維細胞及豬腎、猴腎、地鼠腎等原代細胞。

原代培養的基本過程包括取材、培養材料的制備、接種、加培養液、置培養條件下培養等步驟，在所有的操作過程中，都必須保持培養物及生長環境的無菌。

多數情況下，分散的細胞若屬于貼壁依賴型細胞，就能黏附、鋪展于培養器皿和載體表面生長而形成細胞單層，這種培養方式稱為單層細胞培養（monolayerculture），又叫貼壁培養（adherentculture）。少數情況下，培養的細胞沒有貼壁依賴性，可通過專門設備使細胞始終處于懸狀態而在體外生長，這種形式稱為懸浮培養（suspensionculture）。如何讓接種的細胞盡快貼壁，是決定培養成功的關鍵步驟：

1.取決于適當的生長基質表面；

2.可降低接種后培養液對細胞的浮力，如先少補加少量培養液，待細胞貼壁后再補足營養液繼續培養；

3.注意適當的細胞接種密度，一般105個/ml左右。

體外培養技術中所謂的傳“代"概念并不等于細胞生物學中“親代細胞"與“子代細胞"中“代"的概念。傳代培養的實質就是分割后再一次培養，可以相對地衡量培養物的培養年齡。

二、傳代培養

傳代培養是組織培養常規保種方法之一。也是幾乎所有細胞生物學實驗的基礎。當細胞在培養瓶中長滿后就需要將其稀釋分種成多瓶，細胞才能繼續生長。這一過程就叫傳代。傳代培養可獲得大量細胞供實驗所需。傳代要在嚴格的無菌條件下進行，每一步都需要認真仔細的無菌操作。

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