細(xì)胞免疫熒光實(shí)驗(yàn)的方法、步驟有哪些？

細(xì)胞免疫熒光主要應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)抗原抗體檢測(cè)，適用于細(xì)胞水平實(shí)驗(yàn)。那么細(xì)胞免疫熒光有哪些方法和步驟呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、直接法將標(biāo)記的特異性熒光抗體，直接加在抗原標(biāo)本上，經(jīng)一定的溫度和時(shí)間的染色，用水洗去未參加反應(yīng)的多余熒光抗體，室溫下干燥后封片、鏡檢。二、間接法（較為常用）如檢查未知抗原，先用已知未標(biāo)記的特異抗體（第一抗體）與抗原標(biāo)本進(jìn)行反應(yīng)，用水洗去未反應(yīng)的抗體，再用標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）與抗原標(biāo)本反應(yīng)，使之形成抗體—抗原—抗體復(fù)合物，再用水洗去未反應(yīng)的標(biāo)記抗體，干燥...

查看更多

你知道PCR引物設(shè)計(jì)原則是什么嗎？

PCR引物是人工合成的一段寡聚核苷酸。PCR中通常需要兩種引物。一種與感興趣區(qū)域一端的一條DNA模板鏈互補(bǔ)，另—種與感興趣區(qū)域另一端的另一條DNA模板鏈互補(bǔ)。PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，因此，PCR的首要任務(wù)就是引物設(shè)計(jì)。引物設(shè)計(jì)的好壞，直接影響了PCR的結(jié)果。成功的PCR反應(yīng)既要高效，又要特異性擴(kuò)增產(chǎn)物。那么PCR引物設(shè)計(jì)的原則有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！引物設(shè)計(jì)的目的是在兩個(gè)目標(biāo)之間取得平衡：擴(kuò)增特異性和效率。因此，...

查看更多

你了解食品安全相關(guān)ELISA檢測(cè)試劑盒嗎？

食品安全對(duì)每個(gè)人都很重要。當(dāng)前食品供應(yīng)鏈的全球化可能會(huì)增加人類和其他動(dòng)物性食品中污染物的潛在風(fēng)險(xiǎn)。因此，通過(guò)強(qiáng)有力的手段監(jiān)控和保障我國(guó)的食品安全顯得尤為重要。那么你了解關(guān)于食品安全ELISA（酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定）試劑盒嗎，讓我們一起來(lái)看看吧！一、污染物的精確檢測(cè)和定量：食品安全ELISA試劑盒為研究人員提供了檢測(cè)和定量食品樣品中各種污染物的有力工具。這些污染物包括過(guò)敏原，食源性病原體，獸藥殘留，真菌毒素，甚至抗生素。通過(guò)使用高度特異的抗體，ELISA試劑盒使研究人員能夠準(zhǔn)確地識(shí)...

查看更多

你知道常用的雙染顯色系統(tǒng)有什么嗎？

免疫組化雙染技術(shù)是常用的免疫組化方法之一，它可以通過(guò)使用兩種不同種屬的一抗、兩種不同種屬的二抗系統(tǒng)和不同顏色的顯色系統(tǒng)，同時(shí)檢測(cè)組織切片中兩種或多種抗原的表達(dá)情況。那么，目前常用的雙染顯色系統(tǒng)有什么呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、辣根過(guò)氧化物酶(HRP)檢測(cè)系統(tǒng)辣根過(guò)氧化物酶（HRP）是一種能將過(guò)氧化氫（H2O2）分解為氧氣（O2）和水（H2O）的過(guò)氧化物酶。HRP可以使用DAB作為氫供體，H2O2作為底物，最終產(chǎn)生棕黃色的抗原-抗體結(jié)合的產(chǎn)物。二、堿性磷酸酶(AP)檢測(cè)系統(tǒng)DA...

查看更多

PCR引物設(shè)計(jì)，應(yīng)該注意哪些問(wèn)題？

PCR作為分子生物學(xué)中常用的技術(shù)之一，目的是通過(guò)引物的作用擴(kuò)增DNA序列。那PCR引物設(shè)計(jì)的時(shí)候，應(yīng)該注意哪些問(wèn)題呢？一、引物設(shè)計(jì)區(qū)域：最好在模板cDNA的保守區(qū)內(nèi)DNA序列的保守區(qū)是通過(guò)物種間相似序列的比較確定的。在NCBI上搜索不同物種的同一基因，通過(guò)序列分析軟件(比如DNAman)比對(duì)(Alignment),各基因相同的序列就是該基因的保守區(qū)。二、引物設(shè)計(jì)長(zhǎng)度：15~30bp最you引物長(zhǎng)度(primerlength)常用的是18~27bp,但不應(yīng)大于38,因?yàn)檫^(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)...

查看更多